1. Others
  2. Fluorescent Dye
  3. Fluorescein-5-maleimide

Fluorescein-5-maleimide  (Synonyms: 荧光素-5-马来酰亚胺; N-(5-Fluoresceinyl)maleimide)

目录号: HY-D0098 纯度: 99.05%
COA 产品使用指南

Fluorescein-5-maleimide 是一种荧光染料。Fluorescein-5-maleimide 可以检测真核细胞中的硫醇氧化还原状态。Fluorescein-5-maleimide 可以标记肽并用于检测带负电荷的纳米颗粒。Fluorescein-5-maleimide 可以标记肌动蛋白来探究其与心肌肌球蛋白结合蛋白C (cMyBP-C) 的相互作用,从而帮助开发小分子调节剂用于心力衰竭。Fluorescein-5-maleimide 可以筛选含有半胱氨酸残基的突变蛋白。Fluorescein-5-maleimide 的激发波长为 494 nm,发射波长为 519 nm。

MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务

Fluorescein-5-maleimide Chemical Structure

Fluorescein-5-maleimide Chemical Structure

CAS No. : 75350-46-8

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

规格 价格 是否有货 数量
5 mg ¥375
In-stock
10 mg ¥600
In-stock
25 mg ¥1200
In-stock
50 mg ¥2100
In-stock
100 mg   询价  
200 mg   询价  

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Customer Review

  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

Fluorescein-5-maleimide (N-(5-Fluoresceinyl)maleimide) is a fluorescent dye. Fluorescein-5-maleimide can be used to detect the redox state of thiols in eukaryotic cells. Fluorescein-5-maleimide can label peptides and is used to detect negatively charged nanoparticles. Fluorescein-5-maleimide can also label actin to explore its interaction with cardiac myosin-binding protein C (cMyBP-C), which helps in developing small molecule modulators for heart failure. Fluorescein-5-maleimide can screen mutant proteins that contain cysteine residues. The excitation wavelength of Fluorescein-5-maleimide is 494 nm, and the emission wavelength is 519 nm[1][2][3][4].

体外研究
(In Vitro)

Fluorescein-5-maleimide 荧光探针的配制[1]
1.1 制备储存液
用 d-PBS 配制 1 mM 的 Fluorescein-5-maleimide 储存液。
注:1) 避光保存。
Fluorescein-5-maleimide 用于检测细胞内硫醇氧化还原状态
1) 使用 Ficoll-Paque 密度离心法从静脉血中制备 PBMC,并在 d-PBS 中洗涤。
2) 清洗过的 PBMC (100 μL 中有 106 个细胞) 用抗人 CD3-APC 标记。
3) 用 0.1 μM Fluorescein-5-maleimide 染色,并通过流式细胞术分析。

Fluorescein-5-maleimide 荧光探针的配制[2]
1.1 制备工作液
用 DMSO 配制 50 mM 的 Fluorescein-5-maleimide。
Fluorescein-5-maleimide 荧光探针用于检测纳米颗粒
1) 将工作液以 5: 1 的摩尔比 (探针: 肽) 加入到含有 20.3 mM N-(2-羟乙基) 哌嗪-N’-乙磺酸-KOH、50 mM KCl 和 2 mM 三 (2-羧乙基) 膦的缓冲液的肽溶液 (4.06 mM) 中,用于标记肽。
2) 将 1) 中混合物 (终体积为 125 μL) 在室温下黑暗孵育 2 小时,并轻轻摇动。
3) 加入过量的 DDT (20 mM) 来淬灭反应。
4) 通过丙酮 (1 mL) 沉淀进一步纯化纯标记肽混合物。
5) 将 5 μL 荧光探针添加到 15 μL 的纳米粒子和 130 μL 的缓冲溶液中,检测两者相互作用。
6) 数据分析:通过标记肽的荧光强度变化或/和差分光散射来检测纳米颗粒-肽相互作用。

Fluorescein-5-maleimide 用于检测蛋白相互作用 (肌动蛋白与心肌肌球蛋白结合蛋白C (cMyBP-C))[3]
1) 将 50 μM 的 G-肌动蛋白在 20 mM Tris pH 7.5、0.2 mM CaCl2、0.2 mM ATP 的条件下,加入 3 M KCl (最终浓度为 100 mM) 和 0.5 M MgCl2 (最终浓度为 2 mM) 进行聚合,在 23 °C 下孵育 1 小时。
2) 加入 Fluorescein-5-maleimide (终浓度为 1 mM) ,在 23 °C 下标记 1 小时。
3) 加入五倍摩尔、过量的 DTT 来停止标记。
4) 将 0.25 μM 的 Fluorescein-5-maleimide-肌动蛋白和 0-20 μM 的 TMR-cC0-C2 (cMyBP-C 的 N 末端片段) 共同孵育。
5) 数据分析 (FLT-FRET 测定):首先激发 Fluorescein-5-maleimide 并检测其 FLT,以测量从 Fluorescein-5-maleimide (供体) 到 TMR (受体) 的荧光共振能量转移 (FRET) 的变化,Fluorescein-5-maleimide-肌动蛋白的 FLT 降低 (FRET 增加) 表明结合。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

427.36

Formula

C24H13NO7

CAS 号
性状

固体

颜色

Yellow to orange

Emission (Em)

505

Excitation (Ex)

488

中文名称

荧光素-5-马来酰亚胺

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

溶解性数据
细胞实验: 

DMSO 中的溶解度 : 50 mg/mL (117.00 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3399 mL 11.6997 mL 23.3995 mL
5 mM 0.4680 mL 2.3399 mL 4.6799 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验:

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用
以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: 2.5 mg/mL (5.85 mM); 悬浊液; 超声助溶

    此方案可获得 2.5 mg/mL的均匀悬浊液,悬浊液可用于口服和腹腔注射。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。

    2 g SBE-β-CD(磺丁基醚 β-环糊精)粉末定容于 10 mL 的生理盐水中,完全溶解至澄清透明。
  • 方案 二

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: 2.08 mg/mL (4.87 mM); 悬浊液; 超声助溶

    此方案可获得 2.08 mg/mL的均匀悬浊液,悬浊液可用于口服和腹腔注射。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL

    生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息:

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
请输入您的动物体内配方组成:
%
DMSO +
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠,建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。
方案所需 助溶剂 包括:DMSO ,均可在 MCE 网站选购。 Tween 80,均可在 MCE 网站选购。
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
储备液配制方法 : mg 药物溶于 μL  DMSO(母液浓度为 mg/mL)。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度,以下方案仅供参考,如有需要,请与 MCE 中国技术支持联系。
动物实验体内工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 储备液,加入 μL  μL ,混合均匀至澄清,再加 μL Tween 80,混合均匀至澄清,再加 μL 生理盐水
连续给药周期超过半月以上,请谨慎选择该方案。
请确保第一步储备液溶解至澄清状态,从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热 (超声清洗仪,建议频次 20-40 kHz),涡旋吹打等方式辅助溶解。
纯度 & 产品资料

纯度: 99.05%

参考文献

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 2.3399 mL 11.6997 mL 23.3995 mL 58.4987 mL
5 mM 0.4680 mL 2.3399 mL 4.6799 mL 11.6997 mL
10 mM 0.2340 mL 1.1700 mL 2.3399 mL 5.8499 mL
15 mM 0.1560 mL 0.7800 mL 1.5600 mL 3.8999 mL
20 mM 0.1170 mL 0.5850 mL 1.1700 mL 2.9249 mL
25 mM 0.0936 mL 0.4680 mL 0.9360 mL 2.3399 mL
30 mM 0.0780 mL 0.3900 mL 0.7800 mL 1.9500 mL
40 mM 0.0585 mL 0.2925 mL 0.5850 mL 1.4625 mL
50 mM 0.0468 mL 0.2340 mL 0.4680 mL 1.1700 mL
60 mM 0.0390 mL 0.1950 mL 0.3900 mL 0.9750 mL
80 mM 0.0292 mL 0.1462 mL 0.2925 mL 0.7312 mL
100 mM 0.0234 mL 0.1170 mL 0.2340 mL 0.5850 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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