重组蛋白定制服务

重组蛋白是应用了重组 DNA 或重组 RNA 的技术而获得的蛋白质。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、细胞功能试验、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发等众多领域。近十年来,随着药物蛋白的快速发展,越来越多的高纯度高活性蛋白应用于生命科学和医学等研究领域,如:抗体制备、ELISA、药物研究、免疫实验、细胞培养、晶体结构分析等。

MCE 拥有经验丰富的技术团队和专业高效的重组蛋白表达技术,可提供毫克至克级高纯度高活性蛋白定制服务。MCE 拥有多种蛋白表达系统,包括原核蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统和哺乳动物细胞蛋白表达系统,具备多种融合技术,可以提供在蛋白表达与纯化方面的多种选择。MCE 提供从方案设计、基因优化、表达条件优化到纯化的全流程技术服务体系。我们专注于提供高质量的蛋白,助力您的研究。

  • 从基因设计到蛋白制备
    的一站式服务

  • 自主研发多种高表达
    载体与菌株

  • 提供蛋白在生物研究应用
    中专业的技术支持

  • 提供 mg 至 g 级高纯
    度蛋白定制服务

  • 专业的重组蛋白
    技术研发团队

服务流程

MCE 提供从基因到蛋白的一站式服务,客户可以根据自身需求灵活性选择服务或个性化定制服务。

  • 01 密码子优化
  • 02 基因合成
  • 03 表达载体构建
  • 04 菌株筛选
  • 05 蛋白表达
  • 06 纯化与质检
  • 07 蛋白交付

客户提供

氨基酸序列

最终交付

目的蛋白 质粒(可选) 项目报告

注意事项

01.  除少数评估表达风险高的蛋白外,绝大多数常规蛋白可享受无风险定制,即不表达不收费,无预付款。

02.  不限制氨基酸个数,具体蛋白须经过具体评估。

03.  由于蛋白自身性质等原因,经尝试,蛋白质量和纯度不达要求且不需要交付蛋白,则只收取预付款费用(如有预付款)。

04.  严格质控,默认内毒素 <1 EU/μg,纯度 ≥90%(部分蛋白可达到 ≥95%),如因蛋白性质原因预估纯度低于 90%,则在评估时告知,客
户决定是否继续定制。

表达系统选择指南

类型
大肠杆菌
大肠杆菌无细胞 酵母 哺乳动物细胞 昆虫细胞
表达系统
原核
原核 真核 真核 真核
优势
经济
快速
高产
应用广泛
步骤少
周期短
通量高
经济
快速
部分翻译
后修饰
更接近天然蛋白
更低内毒素
更好的活性
更好的翻译后修饰
基因容量大
可溶蛋白
类似哺乳系统
翻译后修饰
劣势
包涵体
无翻译后修饰
(如糖基化)
内毒素高
大分子量蛋白
可能无法正确折叠
分泌效率低 周期长
成本高
周期长
成本高
缺少部分糖基化
推荐表达
细菌类蛋白
抗原类蛋白
细胞因子
酶类
毒性蛋白
多次跨膜蛋白
激酶
细胞因子
小分子蛋白
酶类
分泌蛋白
跨膜蛋白胞外区
重组抗体
抗体片段
细胞质蛋白
毒性蛋白
跨膜蛋白
分泌蛋白
激酶
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案例分享

大肠无细胞表达系统SLC7A11 Protein, Human (12 次跨膜)

难点: 多次跨膜蛋白疏水性高,表达量低,纯化难度高,很难获得可溶蛋白。

制备过程: 通过体外添加 DNA 模板,ATP,氨基酸,各种底物,细胞抽提物的酶等合成蛋白质,再通过筛选不同的去垢剂来提取目的蛋白,目前我们筛选到 Brij78,FOS12 和 DDM 等效果较好的去垢剂,能够很好的溶解纯化膜蛋白,帮助其在溶液中形成天然正确的构象。

纯化结果图

活性验证图

哺乳细胞表达系统ALPI Protein, Human(糖基化修饰)

特点: 哺乳体系具有糖基化等复杂的后修饰,在分子结构、理化性质和生物学功能等方面,哺乳动物细胞表达的蛋白最接近于天然蛋白。

制备过程: 根据目的蛋白序列,我们对稀有密码子、密码子偏好性等因素进行分析优化后进行全基因合成,经测序无误后克隆至专门的高表达载体,确定质粒的检测結果达到转染要求,选择合适的转染方法和宿主细胞进行转染,转染完成后选择合适的纯化方法结合先进的纯化设备来纯化蛋白。

纯化结果图

活性验证图

昆虫细胞表达系统POLQ Protein, Human(988a.a,大分子量蛋白)

难点: 分泌困难,表达量偏低,纯化困难。

制备过程: 根据目的蛋白序列优化密码子,合成目的基因,将目的基因亚克隆到合适的杆状病毒载体上转染昆虫细胞,得到 P0 代病毒,电泳检测表达量,如有需要再将 P0 代病毒感染细胞得到 P1-P2 代病毒,P1 或 P2 代病毒感染昆虫细胞后通过亲和、离子交换、疏水及分子筛等多种层析方法纯化目的蛋白。

分子量:103.1 kDa

纯化结果图

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重组蛋白定制每个项目需经评估后确定对应的方案和价格。进一步了解服务价格或技术详情等信息,请发邮件至 sales@MedChemExpress.cn 或致电
400-820-3792
,直接与我们取得联系。

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