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Anti-His Magnetic Beads 

Anti-His 磁珠

Cat. No.: HY-K0209
Manual SDS

MCE Anti-His 磁珠用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 His 标签蛋白的免疫沉淀(IP)实验。

Anti-His Magnetic Beads

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

规格 价格 是否有货 数量
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1 mL ¥1780 In-stock
5 mL ¥6940 In-stock

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  • 描述及优势

  • 储存条件 & 期限

  • 操作流程

  • 包装

  • 文件资料

描述及优势

MCE Anti-His 磁珠由高质量的鼠源单克隆 Anti-His 抗体和纳米磁珠共价偶联制备,具有较高的 His 标签融合蛋白加载容量 (> 0.5 mg 蛋白/mL),可用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 His 标记蛋白的免疫沉淀 (IP) 实验。


产品特性
内容物 高质量 Anti-His 单克隆抗体偶联磁珠
磁珠直径 200 nm
载量 > 0.5 mg protein/mL of beads
适用范围 免疫沉淀 (IP),免疫共沉淀 (Co-IP),His-tag 蛋白纯化
推荐使用体积 每 500 μL 细胞裂解液使用 25 μL 磁珠
储存条件 & 期限

4°C,2 年

请勿离心、干燥或冷冻磁珠。

操作流程

1. 抗原样品制备

根据不同的样品选择合适的处理方法

2. 磁珠预处理

混悬 Anti-His 磁珠,取 25 μL 磁珠,置于 1.5 mL EP 管中,加入 500 μL 洗涤缓冲液,充分混悬,置于磁力架上磁性分离,弃上清。重复以上洗涤步骤 2 次。

3. 样品的结合

在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 细胞裂解液,充分混悬,置于翻转混合仪孵育,室温孵育 2 小时或者 4℃ 条件下孵育过夜。置于磁力架上磁性分离,弃上清。

注: 结合过程中,磁珠可能会出现聚团或呈片状,属于正常现象,不会影响实验结果。

4. 洗涤

在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 洗涤缓冲液,充分混悬磁珠,磁性分离,弃上清。重复以上洗涤步骤 3 次,直到洗涤后的上清液中 OD280 小于0.05 为止。

: 如上清液的 OD280 大于 0.05,适当增加洗涤次数即可。

5. 洗脱

本说明书提供三种 Flag 标签蛋白洗脱方案,操作者可以根据后期检测的需要选择不同的洗脱方案。

1) 变性洗脱法:此方法洗脱的样品适用于 SDS-PAGE 检测。 步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 100 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均匀,95°C 加热 5 分钟。分离磁珠,收集上清至新的 EP 管,进行 SDS-PAGE 检测。

2) 酸性洗脱法:此方法洗脱的样品保持原有生物活性,可用于后期功能分析。 步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 100 μL 的洗脱缓冲液 A 混合均匀,室温孵育 10 分钟。分离磁珠,收集上清至新的 EP 管,按每 100 μL 洗脱液加入 10-20 μL 中和缓冲液的比例加入中和缓冲液,将洗脱产物 pH 调节至中性,样品用于后期功能分析。

3) 竞争性洗脱法:此方法洗脱的样品保持原有生物活性,可用于后期功能分析。 步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 3-5 倍磁珠体积的洗脱缓冲液 B 混合均匀,室温孵育 1 小时或者 4°C 条件下孵育 1-2 小时。分离磁珠,收集上清至新的 EP 管,即为目的蛋白,样品用于后期功能分析。

包装
Cat. No. Product Name Package
HY-K0209-1 mL Anti-His Magnetic Beads 1 mL
HY-K0209-5 mL Anti-His Magnetic Beads 1 mL × 5
文件资料
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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产品名称:
Anti-His 磁珠
目录号:
HY-K0209
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