ConA Magnetic Beads 

伴刀豆球蛋白 A (ConA) 磁珠

伴刀豆球蛋白 A （刀豆素 A，Concanavalin A，ConA），是一种从刀豆 (Canavalia ensiformis) 中分离的甘露糖或葡萄糖特异性结合的凝集素 (Lectin)。单体 ConA 分子量为 26 kDa，可结合一个 Ca²⁺ 和一个 Mn²⁺ ，含一个糖结合部位。ConA 在碱性条件下 (pH > 7.0) 以同源四聚体形式存在，酸性条件 (pH 4.5-5.5) 则以活化的二聚体形式存在。在 Ca²⁺、Mn²⁺ 存在时，ConA 对末端 α-D-甘露糖基和 α-D-葡萄糖基具有高亲和力。

MCE 伴刀豆球蛋白 A (ConA) 磁珠由伴刀豆球蛋白 A 与磁珠偶联制成，具有高载量、高特异性和性质稳定等特点，可用于分离细胞或从血清和细胞提取物中分离纯化糖蛋白，也可用于收集和固定细胞核、核酸酶靶向切割和释放 (Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease, CUT & Run) 和标签化靶向切割和释放 (Cleavage Under Targets and Tagmentation, CUT & Tag) 等实验。

4℃，2 年

禁止冻结

1. 细胞收集：准备哺乳动物细胞 (10⁴ - 10⁵ 个)，室温 600× g 离心 3 - 5 min，弃上清收集细胞沉淀。

2. 细胞洗涤：在细胞沉淀中加入 500 μL 结合缓冲液，充分重悬细胞，室温 600× g 离心 3 - 5 min，弃上清收集细胞沉淀。

3. 样本制备：在细胞沉淀中加入 200 μL - 500 μL 结合缓冲液，充分重悬细胞，加入适量的蛋白酶抑制剂（MCE 货号 HY-K0010）并充分混匀。

1. 充分混匀伴刀豆球蛋白 A (ConA) 磁珠，取 10 μL 磁珠混悬液加入离心管中，置于磁性分离器上，磁性分离 1 min，弃上清。

Note: The amount of magnetic beads can be adjusted according to the sample volume.

2. 加入 500 μL 结合缓冲液，用移液器反复吹打 5 次以上使其充分混匀，置于磁性分离器上，磁性分离 1 min，弃上清。重复清洗一次磁珠。

将制备好的样本加入到与处理后的磁珠中，置于混匀仪上 4°C 过夜孵育或室温孵育30 min（具体孵育时间可根据结合效果调整）。

孵育结束后将磁珠置于磁性分离器上，磁性分离 1 min，弃上清。加入500 μL 结合缓冲液，用移液器反复吹打 5 次以上使其充分混匀，置于混匀仪上室温孵育 5 min。将磁珠置于磁性分离器上，磁性分离 1 min，弃上清。重复清洗两次磁珠获得蛋白-磁珠复合物。

在上述蛋白-磁珠复合物中加入 50 μL- - 250 μL 洗脱缓冲液，置于混匀仪上室温孵育 10 - 30 min。将磁珠置于磁性分离器上，磁性分离 1 min，收集上清液即为目的蛋白。

注：可尝试重复洗脱或增加孵育时间提高蛋白得率。

1. 请勿离心、干燥或冷冻磁珠。以上操作可能会引起磁珠聚团，并影响磁珠的结合活性。

2. 为最大限度的降低蛋白质降解，请配合使用 MCE 蛋白酶抑制剂 cocktails (MCE 货号 HY-K0010，HY-K0011)。

3. 建议避免使用含有 EDTA 或其他金属螯合剂的试剂，金属螯合剂会影响磁珠与蛋白的结合效率。

4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。