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Serum/Protein-Free Cell Freezing Medium 

无血清/无蛋白细胞冻存液

Cat. No.: HY-K1012
Manual SDS 技术支持

MCE 无血清无蛋白细胞冻存液是一种非程序性即用型细胞冻存液。该产品既适用于常规哺乳动物细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞的冻存。

Serum/Protein-Free Cell Freezing Medium

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

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100 mL ¥750 In-stock

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  • 描述及优势

  • 储存条件 & 期限

  • 操作流程

  • 文件资料

描述及优势

产品既适用于常规哺乳动物细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞的冻存。本品使用方便,即取即用,冻存过程中无需繁琐费时的程序性降温步骤,可重悬细胞后直接进行冻存。

储存条件 & 期限

4°C,1 年

操作流程

1. 细胞冻存

建议冻存处于对数生长期的细胞,有助于提高复苏细胞存活率。

1.1. 细胞消化:对于贴壁细胞,采用无菌 PBS 洗涤两次后添加适量胰酶将其消化成单细胞悬液;胰酶消化贴壁细胞后最好让细胞在完全培养基中慢慢复苏。整个过程要小心操作,避免人为损伤细胞。悬浮细胞直接进行 1.2 步骤。

注:切记不要过度消化细胞,以消化至刚好能把细胞吹打下来为最佳。否则会影响细胞复苏时的存活率。

1.2. 细胞收集:收集细胞悬液于离心管中,500 g、4℃ 离心 3-5 min。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。

注:尽可能去除上清,以免在下一步稀释细胞冻存液。

1.3. 细胞重悬:向细胞沉淀中加入适量 MCE 无血清无蛋白细胞冻存液,调整细胞浓度至 1 × 106-107 cells/mL。轻轻吹匀至单细胞悬液。整个过程冰上操作,以避免保护剂对细胞造成损伤。

1.4. 细胞分装:将制备好的细胞悬液分装于已标记好的细胞冻存管中,做好密封措施,防止染菌。

1.5. 细胞冻存:直接将含细胞悬液的冻存管放入 -80℃ 冰箱中,24 h 后移入液氮长期保存。

2. 细胞复苏

实验开始前先 37℃ 预热细胞完全培养基。

2.1. 细胞解冻:取出冻存管,并立即放入 37℃ 水浴锅中快速解冻。水浴过程中保证冻存管盖子盖紧,轻轻摇动管子使其融化完全。

2.2. 细胞复苏:待冻存管细胞完全融化后,用 75% 酒精棉球擦拭外管,并立即向冻存管中加入少量完全培养基,轻轻吹匀至细胞悬液;再将细胞悬液移入已含有 5-10 mL 完全培养基的离心管中,充分混合均匀。

2.3. 细胞收集:500 g、4℃ 离心 3-5 min。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。

2.4. 细胞培养:向细胞沉淀中加入适量新鲜细胞培养基,充分混合均匀;镜检后,根据实验需求进行细胞培养。

文件资料
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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产品名称:
无血清/无蛋白细胞冻存液
目录号:
HY-K1012
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