2. Others
  3. Biochemical Assay Reagents
  4. Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg)

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg)  (Synonyms: Pronase (Activity ≥ 4000 U/mg))

目录号: HY-114158A
COA 产品使用指南

摩尔计算器

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) 是从灰色链霉菌 (Streptomyces griseus) 中获得的一种蛋白水解酶混合物，能够将蛋白质消化成单个氨基酸。

MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) Chemical Structure

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) Chemical Structure

CAS No. : 9036-06-0

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构（单位）同一产品试用装仅限申领一次，同一机构（单位）一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户。

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Other Forms of Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg):

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) 相关抗体

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  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) is a mixture of proteolytic enzymes that is obtained from Streptomyces griseus and could digest protein into individual amino acids[1].

体外研究
(In Vitro)

Pronase E 显著增加了所分析的大多数氨基酸的量 (PE 与 C)，尤其是 Ile、His 和 Thr[1]。

Pronase E 使用步骤：
1. 储备液的制备：
(1) 将 Pronase E 溶解于去离子水中，配制成 5-20 mg/ml 的储备液。
注：如用于 DNA 或 RNA 分离步骤，建议先将溶液在 56°C 下加热 15 分钟。
(2) 在 37°C 下孵育 1 小时。 将制备好的储备液分装为一次性等分试样，存储于 -20°C，通常可稳定保存一年。
2. DNA 分离：
直接将 Pronase E 添加到 DNA 制备系统中。 制备系统应含有 0.5-1% 的 SDS，以破坏 DNA 与蛋白质的相互作用。
注：使用浓度 250-500 μg 蛋白质/mL。 孵育条件：37°C 下孵育 1-4 小时。
3. 蛋白质消化：
(1) 将大约 0.2 μM 的蛋白质溶解在 0.2 ml 的 50 mM 碳酸氢铵缓冲液（pH 8.0）或磷酸盐缓冲液（pH 7.0）中。
(2) 添加 1%（w/w）的链霉蛋白酶 E。 在 37°C 下孵育 24 小时，以进行蛋白质消化。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) 相关抗体:
体内研究
(In Vivo)

使用 Pronase E 分离小鼠原代造血干细胞 (HSC) 的实验步骤[2]
1. 动物麻醉与腹腔暴露：
(1) 对雄性或雌性小鼠进行麻醉。
(2) 在无菌操作下，通过腹腔切开术暴露肝脏。
2. 肝脏灌注操作：
(1) 使用 Hanks 缓冲盐溶液（HBSS）从门静脉对肝脏进行灌注，目的是清除血液和杂质。
(2) 进行链霉蛋白酶 E 和胶原酶的酶促灌注，以解离肝脏组织。
3. 肝脏提取与细胞释放：
(1) 使用无菌镊子将肝脏从腹腔内轻柔取出，并迅速转移至无菌培养皿中。
(2) 小心剥离肝包膜，通过温和的机械震荡促使细胞从肝组织中释放。
4. 细胞消化与初步离心分离：
(1) 将所得细胞悬浮于含有链霉蛋白酶 E、胶原酶及 DNase 的混合酶溶液中，并在 37°C 条件下消化 20 分钟。
(2) 通过两次低速离心 (50 g，3 分钟) 分离肝细胞，收集细胞悬液。
5. HSC 的分离与密度梯度离心：
(1) 对细胞悬液进行进一步的离心处理（450 g，8 分钟），收集沉淀部分。
(2) 将沉淀物重新悬浮于 18% 的 Nycodenz 溶液中，作为密度梯度分离的基础。
(3) 构建密度梯度，依次为 12% Nycodenz、8.2% Nycodenz 以及 Gey 平衡盐溶液 (GBSS)。
(4) 通过密度梯度离心，从 8.2% Nycodenz 层中分离并纯化造血干细胞 (HSC)。
注：此方案提供了标准操作流程，实际实验中请根据具体实验需求和条件进行适当调整和优化。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
CAS 号
性状

固体

颜色

Off-white to light yellow

结构分类
初始来源

Streptomyces griseus
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.
溶解性数据
细胞实验： 

H2O 中的溶解度 : ≥ 66.67 mg/mL

* "≥" means soluble, but saturation unknown.

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验：

以下溶解方案，请直接配制工作液。建议现用现配，在短期内尽快用完。 以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比； 如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶。

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂： PBS

    Solubility: 50 mg/mL; 澄清溶液; 超声助溶

动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息：

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

只
由于实验过程有损耗，建议您多配一只动物的量
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
该产品水溶性佳，请具体参考实测 水 / PBS / Saline 中的溶解度数据。
您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度，如有需要，请与 MCE 中国技术支持联系。
纯度 & 产品资料

COA (264 KB)

产品使用指南 (1538 KB)
参考文献

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg) 相关分类

Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

Keywords:

Pronase E (Activity ≥ 4000 U/mg)9036-06-0Pronase (Activity ≥ 4000 U/mg)Biochemical Assay ReagentsInhibitorinhibitorinhibit

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