1. Others
  2. Fluorescent Dye
  3. EN219-alkyne

EN219-alkyne 是炔烃功能化的 EN219 探针。EN219 (HY-P0287A) 是一种特异性适中的作用于 RNF114 的 N 端半胱氨酸 C8 的合成共价配体, IC50为470 nM。EN219 抑制 RNF114 介导的自身泛素化和 p21 泛素化。EN219-alkyne 是一种点击化学试剂。它含有 Alkyne 基团,可以和含有 Azide 基团的分子发生铜催化的叠氮-炔环加成反应 (CuAAc)。

MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务

EN219-alkyne Chemical Structure

EN219-alkyne Chemical Structure

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

规格 价格 是否有货 数量
10 mM * 1 mL in DMSO ¥4301
In-stock
5 mg ¥4000
In-stock
10 mg 现货 询价
25 mg 现货 询价
50 mg 现货 询价
100 mg   询价  
200 mg   询价  

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Customer Review

Other Forms of EN219-alkyne:

  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

EN219-alkyne is an alkyne-functionalized EN219 probe. EN219 (HY-P0287A) is a moderately selective synthetic covalent ligand against an N-terminal cysteine (C8) of RNF114 with an IC50 of 470 nM. EN219 inhibits RNF114-mediated autoubiquitination and p21 ubiquitination[1][2]. EN219-alkyne is a click chemistry reagent, it contains an Alkyne group and can undergo copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition (CuAAc) with molecules containing Azide groups.

体外研究
(In Vitro)

EN219-alkyne 探针原位标记和下拉研究 (以 231MFP 细胞为例)[1]
1.用 DMSO 载体或 50 μM EN219-alkyne 探针处理 231MFP 细胞 90 分钟。
2.将细胞收集在 PBS 中并通过超声处理裂解。
3.制备蛋白质印迹样品:将裂解物 (500 μL 中的 1 mg 蛋白质) 等分到每个样品中,然后按序添加:10 μL 5 mM 生物素吡啶甲酰叠氮化物,50 μL 点击反应混合物 (即三份 TBTA 5 mM TBTA 的丁醇,它包括一份 DMSO (4:1,v/v)、一份 50 mM Cu(II)SO4 溶液,和一份 50 mM TCEP)。
4.温和搅拌样品,在室温下孵育 1 小时。
5.在 CuAAC 之后,通过以 6,500 g 离心沉淀蛋白质,并在预冷的甲醇 (500 μL) 中洗涤两次。
6.样品在预冷 4℃ 离心机中以 6,500 g 离心 4 分钟,吸出过量甲醇,随后通过探针超声在含有 1.2% SDS 的 250 μL PBS 中重组蛋白质沉淀。
7.将蛋白质组在 90℃ 下变性 5 分钟,通过 6,500g 离心沉淀不溶性成分,并将可溶性蛋白质组稀释在 1.2 mL PBS 中 (样品中 SDS 的最终浓度为 0.2%) 至总体积为 1450 μL,保留 50 μL 作为输入。
8.将 85 μL 预洗过的 50% 链霉亲和素琼脂糖珠浆添加到每个样品中,并在室温下轻轻搅拌样品孵育过夜。
9.在室温下以 6,500 g 旋转珠子 2 分钟后,从每个样品中吸出上清液。
10.将珠子转移到旋转柱上并用 PBS 洗涤 3 次。为了洗脱,将珠子在 50 μL LDS 样品缓冲液中煮沸 5 分钟。离心后收集洗脱液并通过免疫印迹分析。

En219 (1 μM; 90 min) 与 RNF114 C8、TUBB1 C201、HSPD1 C442 和 HIST1H3A C97 相互作用,通过同位素串联正交蛋白水解 (isoTOP-ABPP) 分析证实[2]

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

488.76

Formula

C22H19BrClN3O3

性状

固体

颜色

Light brown to brown

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

-20°C, sealed storage, away from moisture

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)

溶解性数据
细胞实验: 

DMSO 中的溶解度 : 100 mg/mL (204.60 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0460 mL 10.2300 mL 20.4599 mL
5 mM 0.4092 mL 2.0460 mL 4.0920 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息:

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
纯度 & 产品资料

纯度: 99.62%

参考文献

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 2.0460 mL 10.2300 mL 20.4599 mL 51.1498 mL
5 mM 0.4092 mL 2.0460 mL 4.0920 mL 10.2300 mL
10 mM 0.2046 mL 1.0230 mL 2.0460 mL 5.1150 mL
15 mM 0.1364 mL 0.6820 mL 1.3640 mL 3.4100 mL
20 mM 0.1023 mL 0.5115 mL 1.0230 mL 2.5575 mL
25 mM 0.0818 mL 0.4092 mL 0.8184 mL 2.0460 mL
30 mM 0.0682 mL 0.3410 mL 0.6820 mL 1.7050 mL
40 mM 0.0511 mL 0.2557 mL 0.5115 mL 1.2787 mL
50 mM 0.0409 mL 0.2046 mL 0.4092 mL 1.0230 mL
60 mM 0.0341 mL 0.1705 mL 0.3410 mL 0.8525 mL
80 mM 0.0256 mL 0.1279 mL 0.2557 mL 0.6394 mL
100 mM 0.0205 mL 0.1023 mL 0.2046 mL 0.5115 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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产品名称:
EN219-alkyne
目录号:
HY-115715A
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