3D Cell-ATP Viability Detection Kit 

ATP 发光法 3D 细胞活力检测试剂盒

MCE ATP 发光法 3D 细胞活力检测试剂盒基于高灵敏度生物发光检测技术（荧光素酶系统），通过对 ATP 进行定量以测定培养物中 3D 细胞数目及细胞活力。直接在细胞培养物中加入本品，细胞团裂解释放出 ATP 并产生稳定的“辉光型”发光信号，发光信号强度与 ATP 含量在一定范围内成正比，间接反映样品中活细胞的数量，可用于活细胞数目的定量检测。

MCE ATP 发光法 3D 细胞活力检测试剂盒具有如下优点

即用型：无需消化、裂解细胞及类器官，检测试剂经过优化具有更强的裂解能力，能够有效渗透到 3D 培养中形成的球状体内部；

操作简便：检测前无需洗涤、更换或去除培养液，直接加入检测试剂室温孵育 30 min 即可进行检测；

稳定性好：“辉光型”发光信号更稳定，发光信号可持续 3 h；

检测方案灵活：适用于多种类型的孔板检测；

适用范围广：适用于少量样品检测和高通量大量样本筛选；

-20℃，1 年

避光保存，避免反复冻融

按照 96 孔板（每孔 100 μL 细胞培养基）加入 100 μL细胞活力检测试剂的量，即 V_培养基 : V_{细胞活力检测试剂} = 1:1，取适量本产品解冻后平衡至室温。

，取适量本产品解冻后平衡至室温。

根据实验条件对细胞进行药物处理，并根据相应培养条件培养 3D 细胞。

1. 取出待检测的细胞培养板，室温平衡 30 min。

2. 每孔加入 100 μL活力检测试剂，室温振荡混匀 5 min以促进细胞充分裂解。

3. 将细胞培养皿室温孵育 25 min，使发光信号趋于稳定。

4. 使用具有检测化学发光功能的多功能酶标仪进行化学发光测定，记录发光值，每个孔的检测时间一般为 0.25-1 s。

注：a. 具体参数可根据仪器类型及检测灵敏度进行适当调整。

b. 活力检测试剂渗透进入 3D 细胞及发光信号趋于稳定的时间与细胞种类、培养时间、3D 细胞团大小均有关，可以通过使用移液器反复吹打来替代振荡操作。

c. 可以在加入活力检测试剂 → 振荡 5 min → 孵育 5 min 后直接开始检测，每隔 5min 检测收集一次发光值，取发光信号趋于稳定的时间点对应发光值作为实验数据。

1. 本产品中含有荧光素酶，其活性对温度较为敏感，反复冻融会致其逐渐失活，建议首次解冻后适当分装冻存，但需注意分装的容器不能有 ATP 污染，避免反复冻融。

2. 本品解冻后 4℃ 避光可稳定保存 2 天。

3. 荧光素酶的对温度较为敏感，反应前细胞和检测试剂均需平衡至室温后再进行测定。

4. 待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰荧光素酶反应，进而影响化学发光信号，可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔来排除溶剂的干扰。

5. 只有当待测细胞团与活力检测试剂完全混合接触并充分裂解时，才能获得最佳的检测效果。若细胞团未充分裂解，致使复孔间发光值不均匀，可通过适当增加振板幅度或延长孵育条件进行优化。

6. 检测时需使用白色或黑色的 96 孔板或 384 孔板。如果使用普通透明的 96 孔板或384 孔板，可能会导致相邻孔之间产生相互干扰。此外，也可以使用专为 3D 培养的超低吸附培养皿或多孔板培养好 3D 细胞后，转移至普通的白色或黑色多孔板中再进行检测。

7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。