2. Others
  3. Fluorescent Dye
  4. Hoechst 33258

Hoechst 33258  (Synonyms: bisBenzimide H 33258; H 33258)

目录号: HY-15558 纯度: 99.11%
COA 产品使用指南

摩尔计算器

Hoechst 33258 是 Hoechst 系列的标记染料。Hoechst 系列是活细胞核标记染料。Hoechst 通过结合 DNA 双链中的小沟而结合核酸。Hoechst 倾向于结合富含 A/T 的 DNA 链。同时，富含 A/T 的双链 DNA 使荧光强度显著增强。Hoechst 可穿过细胞膜，结合活细胞或固定细胞。Hoechst 染料的荧光强度随着溶液 pH 升高而增强。

MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

Hoechst 33258 Chemical Structure

Hoechst 33258 Chemical Structure

CAS No. : 23491-44-3

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构（单位）同一产品试用装仅限申领一次，同一机构（单位）一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户。

规格 价格 是否有货 数量
50 mg ￥750
In-stock
100 mg ￥1200
In-stock
200 mg   询价  
500 mg   询价  

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Customer Review

Other Forms of Hoechst 33258:

Hoechst 33258 相关抗体

Top Publications Citing Use of Products

  • 生物活性

  • 实验参考方法

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

Hoechst 33258 is a marker dye in Hoechst series. Hoechst is A live nuclear marker dye. Hoechst binds to the grooves in the DNA double strand, which tends to be A/ T-rich DNA strand. Although it binds to all nucleic acids, the A/ T-rich double strand DNA significantly enhances fluorescence intensity Therefore,Hoechst dye can be used for living cell labeling. The fluorescence intensity of Hoechst dye increases with the increase of pH of solution[1].

IC50 & Target

IC50: 51.31±4.56 μM (HeLa cell), 32.43±3.27 μM (HL60 cell), 15.42 ± 2.16 μM (U937 cell)[1]
体外研究
(In Vitro)

Hoechst 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储存液。
注：Hoechst 储存液建议分装后于 -4℃ 或 -20℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，终浓度为 10 μg/mL Hoechst 工作液。
注：请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色（悬浮细胞）
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL
2.2 加入 1 mL Hoechst 工作液，室温孵育 3-10 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色（贴壁细胞）
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 3-10 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。


注意事项
1. 请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Hoechst 33258 相关抗体:
分子量

424.50

Formula

C25H24N6O
CAS 号
性状

固体

颜色

Light yellow to yellow

Emission (Em)

451
Excitation (Ex)

356
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

溶解性数据
细胞实验： 

DMSO 中的溶解度 : 41.67 mg/mL (98.16 mM; 超声助溶 (<60°C); 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的 DMSO)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3557 mL 11.7786 mL 23.5571 mL
5 mM 0.4711 mL 2.3557 mL 4.7114 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验：

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：
——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；
以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.90 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

    生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
  • 方案 二

    请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (4.90 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

    20% SBE-β-CD in Saline 的配制（4°C，储存一周）：2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。
动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息：

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

只
由于实验过程有损耗，建议您多配一只动物的量
请输入您的动物体内配方组成：
%
DMSO +
% 
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠，建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。
方案所需 助溶剂 包括：DMSO， ，均可在 MCE 网站选购。 ，Tween 80，均可在 MCE 网站选购。
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
储备液配制方法 : mg 药物溶于 μL  DMSO（母液浓度为 mg/mL）。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度，以下方案仅供参考，如有需要，请与 MCE 中国技术支持联系。
动物实验体内工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 储备液，加入 μL 。 μL ，混合均匀至澄清，再加 μL Tween 80，混合均匀至澄清，再加 μL 生理盐水。
连续给药周期超过半月以上，请谨慎选择该方案。
请确保第一步储备液溶解至澄清状态，从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热 （超声清洗仪，建议频次 20-40 kHz），涡旋吹打等方式辅助溶解。
纯度 & 产品资料

纯度: 99.93%

COA (167 KB) LCMS (134 KB)

产品使用指南 (1538 KB)
染色示例
参考文献
Cell Assay
[2]

Hoechst 33258 is prepared as stock solutions in highly pure water. Working solutions in a concentration range of 10-3-10-6 mol/dm3 are prepared prior to testing. Cytotoxic effects of Hoechst 33258 on tested cell lines are determined by the MTT assay. Cells are seeded in 96 micro well flat bottom plates at a concentration of 2×104 cells/mL and left overnight in the CO2 incubator allowing them to attach to the plate surface. Growing medium is replaced with compound supplemented or control medium and incubated for 72 h. Fresh medium with 5 mg/mL of MTT is added onto cells and incubated for 4 h at 37°C. Upon media removal, water insoluble MTT-formazan crystals formed inside the living cells are dissolved in DMSO and the absorbance at 570 nm proportional to the number of living cells is measured on an Elisa Microplate Reader. All experiments are performed at least three times in triplicates.The GI50 value, defined as the compound concentration (μM) leading to cellular growth inhibition by 50%, is calculated and used as a parameter to compare cytotoxicity among the compounds[2].

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.
参考文献

Hoechst 33258 相关分类

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 2.3557 mL 11.7786 mL 23.5571 mL 58.8928 mL
5 mM 0.4711 mL 2.3557 mL 4.7114 mL 11.7786 mL
10 mM 0.2356 mL 1.1779 mL 2.3557 mL 5.8893 mL
15 mM 0.1570 mL 0.7852 mL 1.5705 mL 3.9262 mL
20 mM 0.1178 mL 0.5889 mL 1.1779 mL 2.9446 mL
25 mM 0.0942 mL 0.4711 mL 0.9423 mL 2.3557 mL
30 mM 0.0785 mL 0.3926 mL 0.7852 mL 1.9631 mL
40 mM 0.0589 mL 0.2945 mL 0.5889 mL 1.4723 mL
50 mM 0.0471 mL 0.2356 mL 0.4711 mL 1.1779 mL
60 mM 0.0393 mL 0.1963 mL 0.3926 mL 0.9815 mL
80 mM 0.0294 mL 0.1472 mL 0.2945 mL 0.7362 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

Keywords:

Hoechst 3325823491-44-3bisBenzimide H 33258 H 33258Hoechst33258Hoechst-33258bisBenzimide H33258bisBenzimide H-33258H33258H 33258H-33258Fluorescent DyeHoechstDNAcellular dyeblue fluorescenceInhibitorinhibitorinhibit

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