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  2. Biochemical Assay Reagents
  3. Tetrazolium Red

Tetrazolium Red  (Synonyms: 四氮唑红; 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride; TPTZ; TTC)

目录号: HY-D0714 纯度: 99.85%
COA 产品使用指南

Tetrazolium Red (2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride; TTC) 是一种不易穿透大脑的无色水溶性染料,主要在活细胞的线粒体中被线粒体酶还原成深红色的,不溶于水的化合物 (甲臜)。Tetrazolium Red 用于观察脱氢酶的活性,暴露于氢气时会由无色变为红色。Tetrazolium Red 能区分中风后存活和坏死的脑组织。Tetrazolium Red 还被用于染色心脏组织,以测量急性损伤的程度,也用于染色脑组织以检测缺血区域的大小。Tetrazolium Red 吸收波长 570 nm。

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Tetrazolium Red Chemical Structure

Tetrazolium Red Chemical Structure

CAS No. : 298-96-4

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2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

规格 价格 是否有货 数量
10 mM * 1 mL in DMSO ¥385
In-stock
500 mg ¥350
In-stock
5 g ¥450
In-stock
10 g   询价  
50 g   询价  

* Please select Quantity before adding items.

Customer Review

  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

Tetrazolium Red (2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride; TTC) is a not brain-penetrant, colorless, water-soluble dye that is reduced by mitochondrial enzymes to a deep red, water-insoluble compound (formazan) mainly in the mitochondria of living cells. Tetrazolium Red is used to observe the activity of dehydrogenase, and it turns colorless to red when exposed to hydrogen. Tetrazolium Red distinguishes between surviving and infarcted brain tissue after stroke. Tetrazolium Red has been used to stain heart tissue to measure the extent of acute lesions and also used to stain brain tissue to detect the size of the infarcted area. The absorption wavelength of Tetrazolium Red is 570 nm[1][2][3][4].

体外研究
(In Vitro)

Tetrazolium Red 对缺血区域大小的染色[3]:
1) 人脐带间充质干细胞 (HUMSCs) 的制备
HUMSCs 从婴儿身上分离出来,并在 37℃ 的 DMEM 中以 10% 的胎牛血清培养。
2) 动物手术
大鼠被氯胺酮麻醉 (400 mg/kg,腹腔注射),进行大脑中动脉闭塞 (MCAO) 手术和再灌注。
注意:在 MCAO 手术中,在右眼眶钻孔以暴露右侧大脑中动脉。动脉在同时夹住两条颈动脉的情况下被结扎 90 分钟,之后移除结扎线和夹子以恢复血流。
3) HUMSCs 的移植
在 MCAO 后 24 小时,通过两次注射将总计 5x105 个 HUMSCs 移植到每只大鼠的缺血皮层中。
4) 缺血皮层的识别
大鼠被深度麻醉并断头。大脑的冠状切片被切成 2 mm 厚,浸泡在 2% Tetrazolium Red 中,然后用 10% 福尔马林固定。
5) 数据分析 (数字图像)
缺血区域的大小,即没有红色染色的区域,使用 ImagePro 软件在数字图像上进行测定。
Tetrazolium Red 染色细胞增殖和活力测量[4]
1) 准备:2-5 mg/mL Tetrazolium Red 溶于 PBS 中。
2) 用血细胞计数板手动计数分离的细胞,然后将不同浓度 (5x104 到 1x106) 的细胞接种到 24 孔培养板中,加入 1 mL 对照培养基,然后放回温箱中,让细胞再附着在塑料培养板上,培养 24 小时。
3) 第二天,去掉培养基,给细胞添加 1 mL 新培养基,然后每个孔加入 200 mL 的 5 mg/mL Tetrazolium Red,使最终浓度为 0.83 mg/mL Tetrazolium Red。将培养板放回温箱 (37℃) 培养 4 小时。
去掉培养基后,每个孔中加入 1 mL 异丙醇以溶解甲臜晶体。在 570 nm 处测量光密度。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

体内研究
(In Vivo)

Tetrazolium Red 对脑损伤以及梗塞区域的大小的染色[1]
1) 对于脂多糖 (LPS) 敏感的新生儿大脑缺氧缺血 (HI),LPS (0.3 mg/kg) 在缺氧缺血 (HI) 前 72 小时通过腹腔注射给 5 天大的CD1 小鼠。在出生后第 8 天,使用 2% 的 isoflurane 麻醉小鼠,并对右侧颈动脉进行永久结扎。小鼠在此后恢复 1.5 小时,然后在一个含有 10% 氧气和 90% 氮气的玻璃腔室中暴露于 37℃ 的水浴中的缺氧环境下。缺氧暴露后,小鼠被送回动物护理设施与母鼠在一起。体内 Tetrazolium Red 标记程序在恢复 48 小时后进行。
2) 在 37℃ 的磷酸盐缓冲液 (PBS) 中制备的甘露醇 (0.5 M-1.4M) 通过腹腔注射给动物 (约 0.1 mL/g 体重),持续时间从 5 分钟到 180 分钟,以破坏血脑屏障 (BBB)。小鼠用 avertin 麻醉,然后用 PBS 进行心脏灌注,之后灌注 10 mL 的 2% Tetrazolium Red。在心脏灌注 Tetrazolium Red 后 10 分钟,动物的大脑被取出并放入 4% 的多聚甲醛中。提取的大脑还可以在温暖的磷酸盐盐水缓冲液 (PBS) 中孵育 30 分钟,以增强 Tetrazolium Red 染色。将大脑取出并分为对侧 (左侧皮层) 和损伤侧 (右侧皮层) 以进行蛋白质提取。
3) 数据分析 (数字图像):脑损伤以梗塞区域 (白区) 与未受损的对侧半球区域的比例表示。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

334.80

Formula

C19H15ClN4

CAS 号
性状

固体

颜色

White to light yellow

中文名称

红四氮唑;四氮唑红;红四唑;四唑红

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

溶解性数据
细胞实验: 

H2O 中的溶解度 : 50 mg/mL (149.34 mM; 超声助溶)

DMSO 中的溶解度 : 16.67 mg/mL (49.79 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.9869 mL 14.9343 mL 29.8686 mL
5 mM 0.5974 mL 2.9869 mL 5.9737 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

* 备注:如您选择水作为储备液,请稀释至工作液后,再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验:

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用
以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 1.67 mg/mL (4.99 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 1.67 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 16.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL

    生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
  • 方案 二

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: ≥ 1.67 mg/mL (4.99 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 1.67 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 16.7 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。

    20% SBE-β-CD in Saline 的配制(4°C,储存一周):2 g SBE-β-CD(磺丁基醚 β-环糊精)粉末定容于 10 mL 的生理盐水中,完全溶解至澄清透明。

以下溶解方案,请直接配制工作液。建议现用现配,在短期内尽快用完。 以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比; 如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶。

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂: PBS

    Solubility: 25 mg/mL (74.67 mM); 澄清溶液; 超声助溶

动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息:

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
该产品水溶性佳,请具体参考实测 水 / PBS / Saline 中的溶解度数据。
您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度,如有需要,请与 MCE 中国技术支持联系。
纯度 & 产品资料

纯度: 99.85%

参考文献

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO / H2O 1 mM 2.9869 mL 14.9343 mL 29.8686 mL 74.6714 mL
5 mM 0.5974 mL 2.9869 mL 5.9737 mL 14.9343 mL
10 mM 0.2987 mL 1.4934 mL 2.9869 mL 7.4671 mL
15 mM 0.1991 mL 0.9956 mL 1.9912 mL 4.9781 mL
20 mM 0.1493 mL 0.7467 mL 1.4934 mL 3.7336 mL
25 mM 0.1195 mL 0.5974 mL 1.1947 mL 2.9869 mL
30 mM 0.0996 mL 0.4978 mL 0.9956 mL 2.4890 mL
40 mM 0.0747 mL 0.3734 mL 0.7467 mL 1.8668 mL
H2O 50 mM 0.0597 mL 0.2987 mL 0.5974 mL 1.4934 mL
60 mM 0.0498 mL 0.2489 mL 0.4978 mL 1.2445 mL
80 mM 0.0373 mL 0.1867 mL 0.3734 mL 0.9334 mL
100 mM 0.0299 mL 0.1493 mL 0.2987 mL 0.7467 mL

* 备注:如您选择水作为储备液,请稀释至工作液后,再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。

Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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