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Anti-HA Magnetic Beads 

Anti-HA 磁珠

Cat. No.: HY-K0201
Manual SDS

MCE Anti-HA 磁珠用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 HA 标记蛋白的免疫沉淀(IP)实验。

Anti-HA Magnetic Beads

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

规格 价格 是否有货 数量
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1 mL ¥1450 In-stock
5 mL ¥5860 In-stock

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MCE 顾客使用本产品发表的 69 篇科研文献

IP

    purchased from MCE. Usage Cited in: Nat Commun. 2024 Mar 8;15(1):1908.  [Abstract]

    Co-IP assays assessing the interaction of ASGR1(WT) or mutant ASGR1 (3A) with GP73 in HepG2 cells. ASGR1 (3 A), the three residues Gln240, Trp244 and Glu253 of ASGR1 were mutated to alanine, n = 3 biologically independent samples.
    • 描述及优势

    • 储存条件 & 期限

    • 操作流程

    • 包装

    • 文件资料

    描述及优势

    MCE Anti-HA Magnetic Beads 由高质量的鼠源 IgG3a 单克隆抗体与氨基磁珠共价偶联制备,具有较高的 HA 标签融合蛋白加载容量 (> 0.5 mg 蛋白/mL),可用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 HA 标签 (YPYDVPDYA) 蛋白的免疫沉淀。

     

    产品优点如下:

    1. 免疫沉淀时只需少量磁珠。

    2. 方便省时。

    3. 非特异性结合率低。

    4. 样品损失少。

    5. 蛋白质结合能力高达 0.6 mg/mL。

    6. 稳定。

    储存条件 & 期限

    4°C,2 年

    请勿离心、干燥或冷冻磁珠。

    操作流程

    1. 抗原样品制备

    根据不同的样品选择合适的处理方法

    2. 磁珠预处理

    混悬 Anti-HA Magnetic Beads,取 10 μL 磁珠,置于 1.5 mL EP 管中,加入 500 μL 洗涤缓冲液,充分混悬,置于磁力架上磁性分离,弃上清。重复以上洗涤步骤 2 次。

    3. 样品的结合

    在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 细胞裂解液,充分混悬,置于翻转混合仪孵育,室温孵育 2 小时或者 4 °C 条件下孵育过夜。置于磁力架上磁性分离,弃上清。

    注意: 结合过程中,磁珠可能会出现聚团或呈片状,属于正常现象,不会 影响实验结果。

    4. 洗涤

    在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 洗涤缓冲液,充分混悬磁珠,磁性分离,弃上清。重复以上洗涤步骤 3 次。

    5. 洗脱

    本说明书提供三种 HA 标签蛋白洗脱方案,操作者可以根据后期检测的需 要选择不同的洗脱方案。

    1) 变性洗脱法:此方法洗脱的样品适用于 SDS-PAGE 检测。 步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 50 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均匀 95°C 加热 5 分钟。分离磁珠,收集上清至新的 EP 管,进行 SDS-PAGE 检测。

    2) 酸性洗脱法:此方法洗脱的样品保持原有生物活性,可用于后期功能分析。 步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 50 μL 的洗脱缓冲液 A 混合均匀,室温孵育 10 分钟。分离磁珠,收集上清至新的 EP 管,按每 50 μL 洗脱液加入 25 μL 中和缓冲液的比例加入中和缓冲液,将洗脱产物 pH 调节至中 性,样品用于后期功能分析。

    3) 竞争性洗脱法:此方法洗脱的样品保持原有生物活性,可用于后期功能分析。 步骤:分离磁珠,弃上清,向磁珠中加入 3-5 倍磁珠体积的洗脱缓冲液 B 混合均匀,室温孵育 1 小时或者 4°C 条件下孵育 1-2 小时。分离磁珠,收集上清至新的 EP 管,即为目的蛋白,样品用于后期功能分析。

    包装
    Components HY-K0201-1 mL HY-K0201-5 mL
    Anti-HA Magnetic Beads 1 mL 1 mL×5
    文件资料
    Help & FAQs
    • Do most proteins show cross-species activity?

      Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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    产品名称:
    Anti-HA 磁珠
    目录号:
    HY-K0201
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