1. Others
  2. Fluorescent Dye
  3. D-Luciferin

D-Luciferin  (Synonyms: D-(-)-Luciferin; Firefly luciferin; Beetle Luciferin)

目录号: HY-12591A 纯度: 99.54%
COA 产品使用指南

D-Luciferin 是荧光素酶 (Luc) 的天然底物,对萤火虫产生典型的黄绿光进行催化。该反应产生的 560 nm 化学发光在几秒钟内达到峰值,当底物荧光素过量时,光输出与荧光素酶浓度成正比。荧光素酶 (luc) 基因是研究和活性分子筛选的常用报告基因。化学发光技术实际上是无背景的,使得 luc 报告基因成为检测低水平基因表达的理想选择。在标准荧光计数仪中可以可靠地测量到 0.02 pg 的荧光素酶。除了用于基因表达的外,荧光素酶还用于 ATP 的检测。MCE 提供萤火虫荧光素酶 (HY-P1004) 、荧光素游离酸 (HY-12591A) 及其水溶性钠盐 (HY-12591) 和钾盐 (HY-12591B) 。

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D-Luciferin Chemical Structure

D-Luciferin Chemical Structure

CAS No. : 2591-17-5

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2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

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规格 价格 是否有货 数量
1 mg ¥174
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5 mg ¥375
In-stock
10 mg ¥600
In-stock
25 mg ¥1065
In-stock
50 mg ¥1600
In-stock
100 mg ¥2463
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Customer Review

Other Forms of D-Luciferin:

MCE 顾客使用本产品发表的 43 篇科研文献

IF

    D-Luciferin purchased from MCE. Usage Cited in: Acta Pharm Sin B. 12 March 2022.

    Tumor growth is monitored by bioluminescence imaging. Prior to imaging, D-luciferin substrate is injected intraperitoneally into the mice (150 mg/kg per mouse).

    D-Luciferin purchased from MCE. Usage Cited in: New Phytol. 2022 Sep 2.  [Abstract]

    ERF16-nLUC and CaM2-cLUC vectors are cotransfected in N. benthamiana leaves. 10 min after the abaxial sides of leaves are sprayed with 1 mM Luciferin.

    D-Luciferin purchased from MCE. Usage Cited in: Pharmacol Res. 2021 Mar 2;105527.  [Abstract]

    After cell inoculation for 7 days, mice are injected intraperitoneally with D-luciferin substrate at 150 mg/kg and anesthetized 10% chloral hydrate (5 mL/kg).

    D-Luciferin purchased from MCE. Usage Cited in: Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 2021;12(3):839-856.

    HEK293T cells are seeded into a 6-well plate and transfected with in vitro synthesized mRNA containing the luciferase gene by Lipofectamine 2000. Luciferase substrate D-Luciferin sodium salt (1 mM) is added into the culture medium immediately after transfection. Luciferase activity is detected on the GloMax 96 Microplate Luminometer.

    D-Luciferin purchased from MCE. Usage Cited in: Cell Death Dis. 2020 Sep 17;11(9):765.  [Abstract]

    At Day 10, 25, and 31, mice are anesthetized with isoflurane and then injected with 75 mg/kg D-Luciferin solution for imaging.
    • 生物活性

    • 实验参考方法

    • 纯度 & 产品资料

    • 参考文献

    生物活性

    D-luciferin is the natural substrate of the enzyme luciferase (Luc) that catalyzes the production of the typical yellowgreen light of fireflies. The 560 nm chemiluminescence from this reaction peaks within seconds, with light output that is proportional to luciferase concentration when the substrate luciferin is present in excess. The luciferase (luc) gene is a popular reporter gene for research and agent screening. Chemiluminescent techniques are virtually background-free, making the luc reporter gene ideal for detecting low-level gene expression. As little as 0.02 pg of luciferase can be reliably measured in a standard scintillation counter. In addition to its role as a reporter of gene expression, luciferase is commonly used in an extremely sensitive assay for ATP[1]. We of er the firefly luciferase (HY-P1004), luciferin free acid (HY-12591A), as well as its water-soluble sodium salts (HY-12591) and potassium salts (HY-12591B) .

    细胞效力
    (Cellular Effect)
    Cell Line Type Value Description References
    HT-29 EC50
    12.9 μM
    Compound: 10
    Agonist activity at human GPR35 expressed in human HT29 cells by DMR assay
    Agonist activity at human GPR35 expressed in human HT29 cells by DMR assay
    [PMID: 23888932]
    HT-29 EC50
    277 μM
    Compound: 10
    Agonist activity at human GPR35 expressed in HT29 cells by beta-arrestin translocation assay
    Agonist activity at human GPR35 expressed in HT29 cells by beta-arrestin translocation assay
    [PMID: 23888932]
    体外研究
    (In Vitro)

    1. 注意事项
    a) D-荧光素有三种形式,分别为游离态 (HY-12591A), 钾盐 (HY-12591B) 和钠盐 (HY-12591),钠盐和钾盐形式的 D-荧光素易溶于水性缓冲液 (pH 6.1-6.5),储备液可用无ATP的水配制,-20℃避光保存。游离态须用 DMSO 或者适当的碱中和才能溶解。在较高的 pH 值下,荧光素会在碱催化下形成脱氢荧光素,并外消旋化为 L-异构体。
    b) D-荧光素可用于任何现有的报告分析或 ATP 分析系统。
    c) 如果测试 ATP,请戴上手套并使用不含 ATP 的容器,以尽量减少所有可能的 ATP 污染源。仅使用无菌的无 ATP 水和试剂。使用高压灭菌水制备所有试剂。
    2. 实验方案
    本方案仅提供一个指导,应根据您的具体需要进行修改。
    2.1 体外生物发光图像分析的示例方案
    a) 在 DMSO 中制备荧光素原液。拌匀。立即使用,或一次性分装,-20℃ 保存,避免反复冻融,避免光照。
    b) 制备0.5-1 mM D-Luciferin工作液,预热组织培养基。
    c) 从培养的细胞中吸出培养基。
    d) 向细胞中加入荧光素工作液,并在成像前于 37℃ 孵育细胞 5-10 分钟。
    2.2 体内实验
    由于体内实验剂量较大,一般为 150 mg/kg,建议选择钾盐 (HY-12591B) 或者钠盐 (HY-12591) 产品。
    2.3 荧光素报告基因检测的示例方案
    a) 在 DMSO 中制备荧光素原液。立即使用,或一次性分装,-20℃ 保存,避免反复冻融,避免光照。
    b) 配制 1 mM D-Luciferin 工作液和 3 mM ATP,1 mM DTT 和 15 mM MgSO4 溶于 25 mM tricine 缓冲液 pH 7.8。
    c) 将 5-10 μL 细胞裂解物移至微孔板中。使用裂解试剂或不含裂解物的缓冲液作为空白。
    d) 根据制造商的说明用荧光素工作溶液灌注发光计。
    e) 立即注入 200 μL 荧光素工作溶液,积分时间为 10 秒.

    MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

    分子量

    280.32

    Formula

    C11H8N2O3S2

    CAS 号
    性状

    固体

    颜色

    White to yellow

    中文名称

    D-萤光素

    结构分类
    初始来源

    insect

    运输条件

    Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

    储存方式

    4°C, protect from light

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

    溶解性数据
    细胞实验: 

    DMSO 中的溶解度 : 125 mg/mL (445.92 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

    H2O 中的溶解度 : 9.09 mg/mL (32.43 mM; ultrasonic and adjust pH to 9 with 1M NaOH)

    H2O 中的溶解度 : < 0.1 mg/mL (insoluble)

    配制储备液
    浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
    1 mM 3.5674 mL 17.8368 mL 35.6735 mL
    5 mM 0.7135 mL 3.5674 mL 7.1347 mL
    查看完整储备液配制表

    * 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
    储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

    • 摩尔计算器

    • 稀释计算器

    Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

    质量
    =
    浓度
    ×
    体积
    ×
    分子量 *

    Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

    This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

    浓度 (start)

    C1

    ×
    体积 (start)

    V1

    =
    浓度 (final)

    C2

    ×
    体积 (final)

    V2

    动物实验:

    请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

    以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
    ——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用
    以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

    • 方案 一

      请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% Corn Oil

      Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (8.92 mM); 澄清溶液

      此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液,此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。

      1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。

    • 方案 二

      请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

      Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (7.42 mM); 澄清溶液

      此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。

      1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL

      生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
    动物溶解方案计算器
    请输入动物实验的基本信息:

    给药剂量

    mg/kg

    动物的平均体重

    g

    每只动物的给药体积

    μL

    动物数量

    由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
    请输入您的动物体内配方组成:
    %
    DMSO +
    +
    %
    Tween-80 +
    %
    Saline
    如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠,建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。
    方案所需 助溶剂 包括:DMSO ,均可在 MCE 网站选购。 Tween 80,均可在 MCE 网站选购。
    计算结果
    工作液所需浓度 : mg/mL
    储备液配制方法 : mg 药物溶于 μL  DMSO(母液浓度为 mg/mL)。

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

    您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度,以下方案仅供参考,如有需要,请与 MCE 中国技术支持联系。
    动物实验体内工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 储备液,加入 μL  μL ,混合均匀至澄清,再加 μL Tween 80,混合均匀至澄清,再加 μL 生理盐水
    连续给药周期超过半月以上,请谨慎选择该方案。
    请确保第一步储备液溶解至澄清状态,从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热 (超声清洗仪,建议频次 20-40 kHz),涡旋吹打等方式辅助溶解。
    纯度 & 产品资料

    纯度: 99.87%

    染色示例
    参考文献
    Animal Administration
    [2]

    Mice[2]
    In vivo BLI is performed using a cooled charge-coupled device camera system (IVIS Imaging System 100) 3, 5, 7, 10, 12, 14, 19, 21, 24, and 28 days after the inoculation of HCT116-Luc cells. Mice are injected with 75 mg/kg D-luciferin in 100 μL of phosphate-buffered saline subcutaneously near the scapula and were placed in the light-tight chamber of the imaging system. Beginning 5 min after injection, dorsal luminescent images with an exposure time of 1 s are acquired sequentially at a rate of one image per min until 20 min after D-luciferin injection. Data acquisition is continued until 40 min postinjection on days 3 or 5 and until 25 min on day 7, because of the prolonged time course of light emission. Binning is 4 and the field of view is 15 cm.

    MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

    参考文献

    完整储备液配制表

    * 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
    储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

    可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
    H2O / DMSO 1 mM 3.5674 mL 17.8368 mL 35.6735 mL 89.1838 mL
    5 mM 0.7135 mL 3.5674 mL 7.1347 mL 17.8368 mL
    10 mM 0.3567 mL 1.7837 mL 3.5674 mL 8.9184 mL
    15 mM 0.2378 mL 1.1891 mL 2.3782 mL 5.9456 mL
    20 mM 0.1784 mL 0.8918 mL 1.7837 mL 4.4592 mL
    25 mM 0.1427 mL 0.7135 mL 1.4269 mL 3.5674 mL
    30 mM 0.1189 mL 0.5946 mL 1.1891 mL 2.9728 mL
    DMSO 40 mM 0.0892 mL 0.4459 mL 0.8918 mL 2.2296 mL
    50 mM 0.0713 mL 0.3567 mL 0.7135 mL 1.7837 mL
    60 mM 0.0595 mL 0.2973 mL 0.5946 mL 1.4864 mL
    80 mM 0.0446 mL 0.2230 mL 0.4459 mL 1.1148 mL
    100 mM 0.0357 mL 0.1784 mL 0.3567 mL 0.8918 mL
    Help & FAQs
    • Do most proteins show cross-species activity?

      Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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    产品名称:
    D-Luciferin
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    HY-12591A
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