1. Metabolic Enzyme/Protease
  2. Liposome
  3. DMG-PEG 2000

DMG-PEG 2000 用于 siRNA 转染 (siRNA delivery) 的脂质体的制备,能够提高转染效率。DMG-PEG 2000 也可被用于脂质纳米颗粒制备,用于口服质粒 DNA 的体内传递途径,DMG-PEG 2000 可以提高纳米颗粒的黏液渗透性和传递效率。

MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报,我们不为任何个人用途提供产品和服务

DMG-PEG 2000 Chemical Structure

DMG-PEG 2000 Chemical Structure

CAS No. : 160743-62-4

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

规格 价格 是否有货 数量
25 mg ¥500
In-stock
50 mg ¥750
In-stock
100 mg ¥1150
In-stock
500 mg ¥3500
In-stock
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Customer Review

  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

DMG-PEG 2000 is used?for the preparation of liposome for siRNA delivery with improved transfection efficiency in vitro. DMG-PEG 2000 is also used for the?lipid nanoparticle for an oral plasmid DNA delivery approach in vivo through a facile surface modification to improve the mucus permeability and delivery efficiency of the nanoparticles[1].

体外研究
(In Vitro)

脂质纳米粒子的制备

我们在此提供 FDA 批准的 mRNA-1273(一种 COVID-19 mRNA 疫苗)中 LNP 的脂质摩尔比。此配方中的脂质摩尔比为 SM-102:DSPC:胆固醇:DMG-PEG 2000 =50 : 10 : 38.5 : 1.5[1],RNA 与脂质的重量比为 0.05 (wt/wt)。

A. 脂质混合物的制备

1. 将脂质溶解于乙醇中,配制成10 mg/mL 的储备溶液。脂质储备溶液可储存于 -20°C 以备后用。

注意事项 1: 可电离脂质通常是液体。由于其粘性,应始终称重,而不是依赖自动移液器的体积。

注意事项 2:胆固醇溶液需保温 (>37℃) 以保持流动性。应及时转移胆固醇溶液,避免冷却。

2. 按照说明制备脂质混合物溶液。每毫升脂质混合物添加以下物质:572 μL 10mg/mL SM-102 (HY-134541)、240 μL 10mg/mL 胆固醇 (HY-N0322)、127 μL 10mg/mL DSPC (HY-W040193) 和 61 μL DMG-PEG 2000 (HY-112764)。充分混合溶液以获得澄清溶液。此混合物含有 10 mg 总脂质。

注意事项 3:脂质和比例的选择可以根据需要进行调整,这将影响 LNP 特性 (如大小、多分散性和效率) 以及所需的 mRNA 量。

B. mRNA 制备

1. 用 100 mM pH 值为 5 的醋酸钠缓冲液制备 166.7 μg/mL mRNA 溶液。

注意事项 4:脂质:mRNA 重量比影响包封效率。可制备其他重量比作为替代配方,用户应进行相应调整。

C. 混合

实现溶液快速混合的常用方法有三种:移液器混合法、涡旋混合法和微流体混合法。所有这些混合方法都可用于各种应用。

值得注意的是,移液器混合法和涡旋混合法可能会产生更多异质性 LNP,包封效率较低,并且容易产生变异。微流体装置能够以高度可控、可重复的方式快速混合,从而实现均质 LNP 和高包封效率。在这些装置中,乙醇脂质混合物和水溶液在单独的流中快速混合。当两股流混合时形成 LNP,然后收集到单个收集管中。

1. 移液器混合方法:

1.1. 吸取 3 mL mRNA 溶液,快速加入 1 mL 脂质混合物溶液中 (一般采用 1:3 的乙醇脂质混合物与水性缓冲液比例)。快速上下移液 20–30 秒。

1.2. 将所得溶液在室温下孵育最多 15 分钟。

1.3. 混合后,将LNPs用 PBS (pH 7.4) 透析 2 小时,用 0.2 μm 过滤器无菌过滤,并在 4°C 下储存。

2. 涡旋混合法:

1.1. 在涡旋混合器上以中等速度涡旋 3 mL mRNA 溶液。然后,快速将 1 mL 脂质混合物溶液加入涡旋溶液中(通常使用 1:3 的乙醇脂质混合物与水性缓冲液的比例)。继续涡旋所得分散液 20-30 秒。

1.2. 将所得溶液在室温下孵育最多 15 分钟。

1.3. 混合后,将 LNPs 用 PBS (pH 7.4) 透析 2 小时,用 0.2μm过滤器无菌过滤,并在 4°C下储存。

3. 微流体混合方法:

1.1 将 3 mL mRNA 缓冲液与1 mL 脂质混合物溶液在微流控装置中以12 mL/min 的总流速混合 (一般采用 1:3 的乙醇脂质混合物与水性缓冲液的比例)。

注意事项 5:可以改变流量比和总流量等参数来微调 LNP。

1.2. 混合后,将 LNPs 用 PBS (pH 7.4) 透析 2 小时,用 0.2μm 过滤器无菌过滤,并在 4°C下储存。

Reference

1. Curr Issues Mol Biol. 2022 Oct 19;44(10):5013-5027.

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

体内研究
(In Vivo)

NP-3(p.o.; 每只小鼠 150 μg DNA;单剂量)在给药后 12、24 和 36 小时,通过腹膜内注射荧光素底物以验证其通透性。NP-3 组在给药后 12-24 小时内在肝脏、肺和肠道区域维持高荧光素酶表达。此外,NP-3 在口服给药后 12 至 24 小时内的信号强度比 NP-1 或 NP-2 组高 1.5 倍[2]

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

2526.00

Formula

(C2H4O)nC32H62O5

CAS 号
性状

固体

颜色

White to light yellow

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

-20°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

溶解性数据
细胞实验: 

DMSO 中的溶解度 : 125 mg/mL (49.49 mM; 超声助溶 (<60°C); 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

Ethanol 中的溶解度 : 100 mg/mL (39.59 mM; 超声助溶)

H2O 中的溶解度 : 16.67 mg/mL (6.60 mM; 超声助溶)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.3959 mL 1.9794 mL 3.9588 mL
5 mM 0.0792 mL 0.3959 mL 0.7918 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

* 备注:如您选择水作为储备液,请稀释至工作液后,再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验:

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用
以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% Saline

    Solubility: ≥ 10 mg/mL (3.96 mM); 澄清溶液

  • 方案 二

    请依序添加每种溶剂: 10% EtOH    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (0.99 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 EtOH 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL

    生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息:

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
该产品水溶性佳,请具体参考实测 水 / PBS / Saline 中的溶解度数据。
您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度,如有需要,请与 MCE 中国技术支持联系。
纯度 & 产品资料

纯度: ≥98.0%

参考文献

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
H2O / Ethanol / DMSO 1 mM 0.3959 mL 1.9794 mL 3.9588 mL 9.8971 mL
5 mM 0.0792 mL 0.3959 mL 0.7918 mL 1.9794 mL
Ethanol / DMSO 10 mM 0.0396 mL 0.1979 mL 0.3959 mL 0.9897 mL
15 mM 0.0264 mL 0.1320 mL 0.2639 mL 0.6598 mL
20 mM 0.0198 mL 0.0990 mL 0.1979 mL 0.4949 mL
25 mM 0.0158 mL 0.0792 mL 0.1584 mL 0.3959 mL
30 mM 0.0132 mL 0.0660 mL 0.1320 mL 0.3299 mL
DMSO 40 mM 0.0099 mL 0.0495 mL 0.0990 mL 0.2474 mL

* 备注:如您选择水作为储备液,请稀释至工作液后,再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。

Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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DMG-PEG 2000
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HY-112764
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