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Cell Ferrous Iron (Fe2+) Assay Kit (Fluorometric) 

细胞亚铁离子 (Fe2+) 检测试剂盒（荧光法）

Cat. No.: HY-K0322
Manual SDS

MCE 细胞亚铁离子 (Fe2+) 检测试剂盒（荧光法）通过荧光检测技术分析细胞中的亚铁离子 (Fe2+) 水平。

Cell Ferrous Iron (Fe<sup>2+</sup>) Assay Kit (Fluorometric)

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构（单位）同一产品试用装仅限申领一次，同一机构（单位）一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户。

规格 价格 是否有货
100 T ￥1900 询问价格 & 货期

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MCE 生物验证

Cell Ferrous Iron (Fe2+) Assay
    Cell Ferrous Iron (Fe2+) Assay Kit (Fluorometric) exhibits high sensitivity to Fe2+ in Vero cells, effectively enabling the detection of intracellular Fe2+.
    Experiment related parameters:
    Detection working solution (final probe concentration 1 μM; incubate for 30 minutes)
    Positive Group: Ammonium Ferrous Sulfate (II) (final concentration of 200 μM)
    Negative Group: 2,2'-Bipyridine (final concentration of 200 μM)

    • 描述及优势

    • 储存条件 & 期限

    • 操作流程

    • 注意事项

    • 包装

    • 文件资料

    描述及优势

    铁是生物体内的重要金属元素，具有多种生理功能。亚铁离子是血红素和血红蛋白的核心成分，并在许多生化反应中发挥关键作用。近年来，随着铁死亡 (Ferroptosis) 概念的提出，研究人员发现铁离子在细胞内的吸收、运输、储存与利用以及过度积累，均与衰老和多种疾病密切相关。

    MCE 细胞亚铁离子 (Fe2+) 检测试剂盒（荧光法）通过荧光检测技术分析细胞中的亚铁离子 (Fe2+) 水平。检测原理为：荧光探针可进入细胞内并与细胞内 Fe2+特异性结合，生成不可逆的橙红色荧光产物 (Ex/Em = 543/580 nm)，通过检测荧光信号实现对细胞内亚铁离子( Fe2+) 的检测。以 96 孔为例，100 T 规格至少可满足 100 个孔样品的检测。
    储存条件 & 期限

    -20℃，6 个月

    避光保存
    操作流程
    预实验确认染色液的最佳浓度（可选）

    由于不同细胞种类、细胞浓度的染色条件不同，建议进行预实验摸索荧光探针的最佳浓度。常规细胞染色，荧光探针的工作浓度可在 1 - 5 μM 之间调整。

     

    染色工作液的配制

    以下以荧光探针工作浓度为 1 μM 为例。（也可根据预实验确定最佳浓度）

    注：一般满足信号足够的前提下，建议尽可能选择最低浓度的荧光探针剂量进行实验。

    1. 试剂准备：取出荧光探针和染色缓冲液，室温平衡 30 min。

    注：建议首次使用时将荧光探针适当分装，避免反复冻融。

    2. 染色工作液准备：取适量染色缓冲液，加入适量荧光探针稀释 2000 倍，充分混匀制备染色工作液，荧光探针终浓度为 1 μM。

    注：a. 根据样品数和孔板类型计算所需的染色工作体积。以 96 孔为例，每孔需要 100 μL 染色工作液。

    b. 染色工作液建议现配现用，配制好后避光，当天使用。

     

    染色

    贴壁细胞染色

    1. 将贴壁细胞接种至细胞培养板、微孔板或制成细胞爬片，在培养箱中过夜培养。

    注：悬浮细胞也可制成细胞爬片，按贴壁细胞步骤进行染色。

    2. 弃上清液并用无血清培养基或 PBS 洗涤细胞 2 - 3 次。

    3. 根据实验设计药物处理细胞后，用染色缓冲液洗涤细胞 2 - 3 次。

    4. 加入足量染色工作液，保证单层细胞被充分覆盖。

    5. 37ºC 培养箱孵育 20 - 60 min。

    注：生成的荧光产物容易淬灭，建议孵育后 2 h 内完成检测。

    悬浮细胞染色（以 96 孔板为例）

    1. 1,000 rpm 离心 3 min，弃上清收集细胞并用无血清培养基或 PBS 洗涤细胞 2 - 3 次。

    2. 根据实验设计药物处理细胞后，1,000 rpm 离心 3 min，弃上清收集细胞并用染色缓冲液洗涤细胞 2 - 3 次。

    注：建议细胞量为 1 × 104 - 1 × 105。

    3. 细胞沉淀用 100 μL 染色工作液重悬，37ºC 培养箱孵育 15 - 30 min。

    注：生成的荧光产物容易淬灭，建议孵育后 2 h 内完成检测。

     

    荧光检测与分析

    贴壁细胞：染色孵育结束后无需清洗，直接在荧光显微镜下观察细胞 (Ex/Em = 543/580 nm)。

    悬浮细胞：染色孵育结束后无需清洗，直接用荧光酶标仪或流式细胞仪进行检测 (Ex/Em = 543/580 nm)。

    注：染色孵育后无需更换培养基或清洗细胞，更换培养基可能会导致探针泄露至胞外影响检测结果。
    注意事项

    1. 荧光探针使用前需要充分溶解混匀，建议适当分装，避免反复冻融。

    2. 本品适用于活细胞检测，对于死细胞无法发挥出荧光探针的正常性能。

    3. 建议设置对照组观察荧光强度的变化。阴性对照加入铁螯合剂（如 2,2'-Bipyridine，Bpy，MCE 货号：HY-D0020）；阳性对照加入硫酸亚铁铵。

    4. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

    5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

    6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
    包装
    Components HY-K0322-100 T
    Fluorescent Probe (2 mM) 100 μL
    Staining Buffer Solution 100 mL
    文件资料
    Help & FAQs
    • Do most proteins show cross-species activity?

      Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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    产品名称：
    细胞亚铁离子 (Fe2+) 检测试剂盒（荧光法）
    目录号：
    HY-K0322
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