2. Anti-infection NF-κB Apoptosis
  3. Fungal IKK NF-κB Apoptosis
  4. Malachite green hemioxalate

Malachite green hemioxalate  (Synonyms: 孔雀石绿草酸盐; MCCK1)

目录号: HY-D0162 纯度: ≥98.0%
COA 产品使用指南 技术支持

Malachite green hemioxalate (MCCK1) 是一种三苯基甲烷染料，可用于检测酶促反应中磷酸盐的释放。Malachite green hemioxalate 具有抗菌活性，这归因于抑制细胞内酶、插入 DNA 和/或与细胞膜相互作用。Malachite green hemioxalate 也是一种有效和选择性的 IKBKE 抑制剂，同时抑制其下游靶标，如 IκBα，p65 和 IRF3。Malachite green hemioxalate 在体外和体内均表现出抗肿瘤活性。

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Malachite green hemioxalate Chemical Structure

Malachite green hemioxalate Chemical Structure

CAS No. : 2437-29-8

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  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

Malachite green hemioxalate (MCCK1) is a triphenylmethane dye which can be used to detect the release of phosphate in enzymatic reactions. Malachite green hemioxalate has antibacterial activity, which is attributed to inhibition of intracellular enzymes, insertion into DNA and/or interaction with cell membranes. Malachite green hemioxalate is also a potent and selective inhibitor of IKBKE, and inhibits its downstream targets such as IκBα, p65 and IRF3. Malachite green hemioxalate exhibits antitumor activity in vitro and in vivo[1][2][3].

IC50 & Target

IKBKE[3]
体外研究
(In Vitro)

Malachite green hemioxalate (MCCK1) (5 μM；处理 12 小时) 在 pCMV-3B-Myc-IKBKE 稳定转染的 NIH3T3 细胞中抑制细胞生长，而对 pCMV-3B 转染的 NIH3T3 细胞无明显影响[2]。
MCCK1 (2-5 μM) 在以髓鞘碱性蛋白 (MBP) 为底物的体外激酶实验中，能有效抑制 IKBKE 对 MBP 的磷酸化，且呈剂量依赖性[2]。
Malachite green hemioxalate (2.5 μM；处理 2 小时) 在转染了 NF-κB 和 IFN-β 启动子与荧光素酶基因融合的报告质粒的 HEK293 细胞中，显著降低了 NF-κB 和 IFN-β 报告基因的荧光素酶活性[2]。
Malachite green hemioxalate (0.1-2.5 μM；处理 2 小时) 在表达 myc 标签的 IKBKE 的 HeLa 细胞中，以剂量依赖的方式显著降低 p65、IκBα 和 IRF3 的激活/磷酸化水平[2]。
Malachite green hemioxalate (1-5 μM；处理 72 小时) 在多种癌细胞系（包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌和结直肠癌）中，对 IKBKE 高表达的细胞系抑制作用明显，细胞存活率较低；对 IKBKE 低表达的细胞系抑制作用较弱，细胞存活率较高[2]。
Malachite green hemioxalate (5 μM；处理 48 小时) 在多种癌细胞系（包括乳腺癌、卵巢癌、肺癌和结直肠癌）中，通过 Annexin V/PI 流式细胞术和 WB 检测发现，IKBKE 高表达的细胞系凋亡率更高，且 cleaved PARP 水平更高[2]。
Malachite green hemioxalate 晶体呈鲜艳闪亮的翠绿色，溶液在 pH=2 时呈类似颜色。随着 pH 值的增加，颜色变为蓝色，pH 值高于 6 时，无色沉淀。这种颜色变化已用于磷酸盐的比色测定。如果立即加入活组织，即使 pH 保持中性也不会有沉淀，溶液至少可稳定 24 小时[1]。
黑麦草的叶子[1]
1. 用手持剃须刀片从新鲜叶子组织上切下切片，在 1% 戊二醛和 0.1% Malachite green hemioxalate 中固定 30 分钟。然后用 1% 四氧化锇浸润切片 10 分钟，清洗并用水封片。
2. 用 70% 乙醇中的饱和苏丹 B 黑溶液对新鲜叶子组织切片染色 5 分钟，用 70% 乙醇清洗并封片在甘油中。
用 X100 油平场复消色差物镜和 X6.3 目镜观察切片。
用光学显微镜观察。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Malachite green hemioxalate 相关抗体:

Cell Viability Assay[2]

Cell Line: Breast cancer cell lines (BT474, MCF7, MDA-231, MDA-435, MDA-468, T47D), Colon cancer cell lines (HCT116, HT29), Lung cancer cell lines (A549, H292, H1299, H1703, H4006), Ovarian cancer cell lines (OVCAR3, OVCAR 2008), HEK293, HeLa cells
Concentration: 1 μM, 2 μM, 2.5 μM, 5 μM
Incubation Time: 72 h
Result: Cell lines with high IKBKE expression (such as MDA-468, HT29, OVCAR3) had a significantly lower viability compared to cell lines with low IKBKE expression (such as HCT116, OV2008).

Apoptosis Analysis[2]

Cell Line: MDA-468, HT29, OVCAR3, MCF7, HCT116, OV2008 cells Cell lines with high IKBKE expression showed a higher apoptosis rate.
Concentration: 5 μM
Incubation Time: 48 h
Result: Cell lines with high IKBKE expression (such as MDA-468, HT29, OVCAR3) had a significantly lower viability compared to cell lines with low IKBKE expression (such as HCT116, OV2008).

Western Blot Analysis[2]

Cell Line: MDA-468, HT29, OVCAR3, MCF7, HCT116, OV2008 cells Cell lines with high IKBKE expression showed a higher apoptosis rate.
Concentration: 0.1 μM, 0.5 μM, 1 μM, 2.5 μM
Incubation Time: 2 h
Result: Decreased the phosphorylation levels of p65, IκBα, and IRF3 in HeLa cells expressing myc-tagged IKBKE.
体内研究
(In Vivo)

Malachite green hemioxalate (MCCK1) (10mg/kg；腹腔注射；隔天一次；6 周) 在接种了人结肠癌细胞或卵巢癌细胞的 NOD/SCID 裸鼠模型中，显著抑制 IKBKE 高表达癌细胞来源的肿瘤生长，对 IKBKE 低表达癌细胞来源的肿瘤生长无明显抑制作用[2]。 雌性和雄性 B6C3F1 小鼠和 Fischer 344 大鼠在 28 天内被喂食高达 1200 ppm 的 Malachite green hemioxalate，以确定染料的毒性和代谢。在施用 Malachite green hemioxalate 的大鼠中，肝细胞出现空泡化，并在啮齿动物组织中代谢为一级和二级芳胺，这是与接触孔雀绿相关的不良影响[3]。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Animal Model: 8-week-old NOD/SCID mice, tumor cells (Colon cancer (IKBKE-high HT29 and IKBKE-low HCT116) and ovary cancer (IKBKE-high OVCAR3 and IKBKE-low OV2008) cells) were mixed in Matrigel and injected subcutaneously or intracranially[2]
Dosage: 10 mg/kg
Administration: Intraperitoneal injection, every other day for 6 weeks
Result: Significantly inhibits the growth of tumors derived from cancer cells with high IKBKE expression, while having no significant inhibitory effect on the growth of tumors derived from cancer cells with low IKBKE expression.
Significantly promoted apoptosis of IKBKE-high xenograft tumor cells, as indicated by increased TUNEL-positive cells and higher expression of Caspase-3, and also suppressed the proliferation of these cells.
分子量

463.50

Formula

C23H25N2.1/2C2H2O4.C2HO4
CAS 号
性状

固体

颜色

Green to dark green

中文名称

孔雀石绿草酸盐；孔雀绿草酸盐；草酸孔雀石绿
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.
储存方式

4°C, protect from light, stored under nitrogen

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)

溶解性数据
细胞实验： 

DMSO 中的溶解度 : ≥ 10 mg/mL (21.57 mM; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响，请使用新开封的 DMSO)

* "≥" means soluble, but saturation unknown.

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.1575 mL 10.7875 mL 21.5750 mL
5 mM 0.4315 mL 2.1575 mL 4.3150 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验：

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：
——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；
以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.39 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

    生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
  • 方案 二

    请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.39 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

    以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

    2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。
动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息：

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

只
由于实验过程有损耗，建议您多配一只动物的量
请输入您的动物体内配方组成：
%
DMSO +
% 
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠，建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。
方案所需 助溶剂 包括：DMSO， ，均可在 MCE 网站选购。 ，Tween 80，均可在 MCE 网站选购。
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
储备液配制方法 : mg 药物溶于 μL  DMSO（母液浓度为 mg/mL）。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)

您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度，以下方案仅供参考，如有需要，请与 MCE 中国技术支持联系。
动物实验体内工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 储备液，加入 μL 。 μL ，混合均匀至澄清，再加 μL Tween 80，混合均匀至澄清，再加 μL 生理盐水。
连续给药周期超过半月以上，请谨慎选择该方案。
请确保第一步储备液溶解至澄清状态，从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热 （超声清洗仪，建议频次 20-40 kHz），涡旋吹打等方式辅助溶解。
纯度 & 产品资料

纯度: ≥98.0%

COA (289 KB) HNMR (280 KB) MS (192 KB)

产品使用指南 (1538 KB)
参考文献

Malachite green hemioxalate 相关分类

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light, stored under nitrogen)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 2.1575 mL 10.7875 mL 21.5750 mL 53.9374 mL
5 mM 0.4315 mL 2.1575 mL 4.3150 mL 10.7875 mL
10 mM 0.2157 mL 1.0787 mL 2.1575 mL 5.3937 mL
15 mM 0.1438 mL 0.7192 mL 1.4383 mL 3.5958 mL
20 mM 0.1079 mL 0.5394 mL 1.0787 mL 2.6969 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

Keywords:

Malachite green hemioxalate2437-29-8MCCK1孔雀石绿草酸盐孔雀绿草酸盐草酸孔雀石绿MCCK 1MCCK-1FungalIKKNF-κBApoptosisIκB kinaseI kappa B kinase Nuclear factor-κBNuclear factor-kappaBphosphateenzymaticIKBKEIκBαp65IRF3antitumorInhibitorinhibitorinhibit

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